比利時國土內有 9 處尼尼遺址，之前定年指出，最年輕的尼尼距今不到 3 萬年。但是近年對其他歐洲遺址的調查，認為 4 萬年前過後已經沒什麼尼尼惹。這個 2021 年的論文重新分析比利時的尼尼，發現之前低估年代，其實是 4 萬多年。
Reevaluating the timing of Neanderthal disappearance in Northwest Europe
論文由 3 處遺址取樣：Spy、Engis、Fonds-de-Forêt。Spy 遺址至今出土過 9 位尼尼，各式研究不少；這回由其中 4 位取樣，共獲得 5 個新的年代。其餘 2 處遺址各貢獻一件樣本。
BTW，「尼安德塔人」名號來自德國的尼安德河谷，不過這兒卻不是首度出土尼尼的地方。尼尼谷 1856 年出土尼尼一號以前，直布羅陀在 1848 年，以及這回的 Engis（Schmerling Caves ）在 1829 年，早已先出土過尼尼。只是當時有眼不識尼尼，才讓尼尼獲得尼尼之名。
回到新的論文。碳同位素定年法，連小學生都聽過。用這類方法研究尼尼，常見的問題是比較新的碳，混進真正代表當事人的樣本中，導致獲得年代被新碳拉低。（比方說 3.5 萬混入 1 萬，誤判為 2.3 萬）
這個論文採取新的取樣和分析法：「compound-specific radiocarbon analysis（簡稱 CSRA）」—由骨頭中的膠原蛋白，分離出特定的氨基酸 hydroxyproline（簡稱 HYP），專門對裡頭的碳定年，以避免汙染。
3 處遺址所有尼尼的定年結果，皆為 4 萬多年左右，都比之前的定年更老，可見以前的分析應該都受到年輕碳的汙染。
這回唯一例外是 Spy572a，距今只有 3.3 萬年而已。論文試圖從中取得古代DNA，結果沒有發現人類的，反而偵測到某種牛的粒線體 DNA。
古代DNA 一大特色是，由於年久失修，DNA片段邊緣的 C，容易經過去胺作用（deamination）變成 T。樣本中有愈多片段配備這類改變，表示樣本可能愈古早。
Spy572a 樣本中的牛牛 DNA 卻沒什麼變化，意謂它經歷的歲月有限。 由此推論 Spy572a 應該是混進來自年輕牛牛的膠原蛋白，古早尼尼和年輕牛牛的氨基酸混在一起，才拉低尼尼的年代。
即使這次的碳同位素定年，採取當下最進步的分析辦法，樣本仍然有可能受到汙染 QQ
除此之外，論文也由 Fonds-de-Forêt 樣本中，取得不少尼尼的古代DNA，並拼湊出覆蓋率 135 的粒線體。他和 Goyet Q57-1、Feldhofer 1、Vindija 33.25 最親近，遺傳上算是末代尼尼的一員。
比利時位於歐洲的西北部，根據這批尼尼的定年結果，論文估計，比利時尼尼最後出沒的年代，比之前的定年結果更早，介於距今 40600 到 44200 年之間。
直布羅陀，第二位尼安德塔人Forbes' Quarry的DNA
請給我一些錢、機器，跟尼安德塔人骨頭－《尋找失落的基因組》＋《每個人的短歷史》
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